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小鼠胚胎細胞NIH/3T3
產品簡介:

小鼠胚胎細胞NIH/3T3
我司主要經營產品是國內傳代細胞和細胞培養(yǎng)相關的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產品、ELISA 試劑盒等產品。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購!

產品型號:NIH/3T3

更新時間:2023-12-20

廠商性質:經銷商

訪 問 量 :1497

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產品介紹

產品名稱:小鼠胚胎細胞NIH/3T3

貨號:QS-M002

細胞規(guī)格:1-3×10^6細胞量

庫存狀態(tài):現貨

培養(yǎng)DMEM(H)+10%NCS

凍存條件:80%*培養(yǎng)液+10%FBS+10%DMSO

運輸方式:常溫順豐運輸和干冰順豐運輸

貨 期:復蘇細胞需要1-2周,凍存細胞的需要3-5天(特殊情況會有說明)

質 控:無支原體、無污染、符合標準

研究范圍:僅供科研使用

我司是一家專注于生命科學技術領域的高科技企業(yè),在廣大用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一,一站式采購商城,代理亞洲、歐美國家300多種品牌,200萬種以上產品。公司的服務和業(yè)務網絡遍及全國,在同行獲得*。

小鼠胚胎細胞NIH/3T3

我司主要經營產品是國內傳代細胞和細胞培養(yǎng)相關的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產品、ELISA 試劑盒等產品。售后完善,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購!

我司以客戶為核心,以產品質量求生存,以售后服務求信譽。我們通過不斷改進來提高效率,絕不以犧牲品質作為代價。“誠信、創(chuàng)新、嚴謹、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作,共創(chuàng)輝煌!

細胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎物質,由于不同細胞來源不同的組織器官環(huán)境,其體外培養(yǎng)所需的養(yǎng)分不盡相同,選擇合適的培養(yǎng)基對細胞的培養(yǎng)至關重要。

按培養(yǎng)基的來源可分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基(目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基)。按其物質狀態(tài)可分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類,干粉培養(yǎng)基需由實驗者自己配制并滅菌(可靈活配制配比),液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供(用戶可直接使用,非常方便)。

合成培養(yǎng)基成分

主要成分有:氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質。

氨基酸:是組成蛋白質的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養(yǎng)液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。因此,各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培養(yǎng)液內。已含谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存2 周以上時,還應重新加入原來量的谷氨酰胺。

維生素:在細胞培養(yǎng)中,盡管血清是維生素重要來源,但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細胞系生長。

碳水化合物:是細胞生長主要能量來源,其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。

無機鹽:培養(yǎng)液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細胞調節(jié)細胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通常可耐受260mOsm/kg~320 mOsm/kg。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養(yǎng)液中添加HEPES 時需按以下“緩沖系統”方法調節(jié)鈉離子濃度。

緩沖系統:大多數細胞所需pH 在7.2 - 7.4。但是,細胞培養(yǎng)zui適pH 值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH (7.4 - 7.7), 而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多數培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2 體系進行緩沖,因此,氣相中的CO2 濃度應與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2 濃度設定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為1.97g/L;如果CO2 濃度維持在10%,培養(yǎng)液中NaHCO3 的加入量為3.95g/L。同時,細胞培養(yǎng)瓶蓋不應擰得太緊,以保證氣體交換。HEPES 是一種非離子緩沖液,在pH 7.2 - 7.4 范圍內具有較好的緩沖能力,但是非常昂貴,在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34g/L)共用,以抵消因額外加入HEPES 引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下,細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應擰緊,以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,酸性培養(yǎng)液呈橙黃色,堿性培養(yǎng)液呈深紅色。

其它成分:

在一些較為復雜的培養(yǎng)液中還包括其它一些成分,如:

(1)非必需氨基酸:有些細胞需要額外添加。

(2)丙酮酸鈉:是糖酵解的中間產物,可直接進出細胞,作為替代碳源添加。

(3)胰島素:可以促進細胞增殖。

(4)qing化可的松:可促進表皮細胞生長。

(5)IL-2:促進淋巴細胞生長,NK92依賴等。

(6)地塞米松:激素類,促進部分細胞生長。

(7)腎上腺素:促進部分細胞生長。

(8)轉鐵蛋白:為細胞內化和細胞代謝提供所需的鐵。

(9)2-qiu基乙chun(2-Mercaptoethanol,2-Me):2-Me的活性部分是硫氫基,其中一個重要作用是使血清中含硫的化合物還原成谷胱甘肽,能誘導細胞的增殖,為非特異性的激活作用。另一個重要作用是促進分裂原的反應和DNA 合成,增加植物凝集素(PHA)對淋巴細胞的轉化作用。

液體培養(yǎng)基保存

液體培養(yǎng)基應于4℃冰箱避光保存,實驗前放入37℃預熱。未加血清液體培養(yǎng)基有效期為12個月。液體培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解。如果細胞生長不良,可以再添加適量L-谷氨酰胺。

干粉培養(yǎng)基保存

4℃冰箱避光保存,有效期36個月。

血清

細胞培養(yǎng)液中添加的血清有牛血清、馬血清、人血清等,其中牛血清是zui常用的血清,分為胎牛、新生牛和小牛血清。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清,價格昂貴。新生牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來的血清,如廠家能做到這一點,新生小牛血清的質量與胎牛血清的質量相差不大。小牛血清,如小牛出生后已哺乳,從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質,其質量明顯不如前兩種。

血清的質量,種類及使用的濃度都有可能影響細胞的生長,而不同批次的血清支持細胞生長的能力也不同,尤其是對克隆細胞的生長,某些批次血清可能含有毒性或抑制細胞生長的物質。因此,在購買大量血清之前,必須對血清支持細胞生長能力進行檢測,然后再大量購買質量好的同一批號的血清,并注意以下幾點:

(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃–-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。

(2)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清。

(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃ 進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。

(4)熱滅活是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。

(5)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破會而影響血清質量。

(6)血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量。可用離心3000rpm, 5 分鐘去除,也可不用處理。

(7)顯微鏡下“小黑點”:經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點”,常誤認為血清受污染。一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。

 

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