細胞名稱：人肺腺癌細胞（SPC-A1）

細胞介紹：該細胞源自一位男性肺腺癌患者。

細胞特性：

1）來源：肺癌

2）形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長

3）含量：>1x106

4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：（1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；（2）存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

收到細胞后請拍照，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系。

細胞用途：僅供科研使用。細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的*培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。                      

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；P/S雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，*培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 

3. 輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例；

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

注意事項：

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

人肺腺癌細胞（SPC-A1）

肺癌（carcinoma of the lung）是常見的惡性腫瘤之一。近年來肺癌的發(fā)病率及死亡率在世界范圍內(nèi)呈明顯上升的趨勢，我國城市人口與某些發(fā)達國家整體水平一樣，肺癌居常見腫瘤的。

    根據(jù)WHO的新分類，組織學上將肺癌分為鱗狀細胞癌、腺癌、大細胞癌、腺鱗癌、神經(jīng)內(nèi)分泌癌、肉瘤癌、其他類型癌和唾液腺來源的癌等8個基本類型。肺鱗狀細胞癌是肺癌常見的類型。近年來肺腺癌發(fā)生率有不斷上升的趨勢，已接近或超過鱗狀細胞癌，是女性肺癌常見的類型，多為非吸煙者。

多數(shù)肺腺癌起源于較小的支氣管，為周圍型肺癌，癌腫多呈球塊狀并靠近胸膜。由于肺腺癌的解剖學和細胞行為特點，易于發(fā)生血行轉(zhuǎn)移和胸腔浸潤，故在胸水中檢出肺癌細胞多為腺癌細胞。腺癌細胞在細胞形態(tài)上有其共同的特征，如細胞菊花狀、蜂窩狀或腺腔樣排列成團；細胞胞體大或巨大，不規(guī)則；核大，偏位，核仁明顯增大或多核仁；胞質(zhì)豐富，著色不均，有分泌顆?；蝠ひ号莸龋煌慕M織來源的腺癌、不同標本類型浸潤的腺癌細胞也存在個體差異，現(xiàn)分析一例胸水中肺腺癌細胞的形態(tài)特征。

人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細胞系 5-8F  1640+10%FBS+1%P/S    貼壁生長

人鼻咽癌細胞 C666-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長

人鼻咽癌細胞 NPC/HK-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長

豬鼻甲黏膜成纖維細胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長

人卵巢癌細胞 A2780 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S   

人卵巢癌細胞+GFP A2780+GFP 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S  

人卵巢腺癌細胞 CAOV-3 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞 CoC1  1640+10%FBS+1%P/S  

人卵巢透明細胞癌細胞 ES-2 McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞 HEY DMEM+10%FBS+1%P/S  

人卵巢癌細胞 HEY A8 DMEM+10%FBS+1%P/S

人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞 HO-8910PM 1640+10%FBS+1%P/S

人正常卵巢上皮細胞系 IOSE-80（IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN） 1640+10%FBS+1%P/S

人卵巢顆粒細胞瘤細胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S

人卵巢腺癌細胞 OVCAR-3 1640(含NaHCO3 1.5g/L)+20%FBS+1%P/S + 0.01mg/ml牛胰島素

人卵巢癌細胞 SK-OV-3 Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞熒光素酶標記 SK-OV-3+LUC Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

小鼠卵巢上皮癌細胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S  

倉鼠卵巢細胞 CHO DMEM+10%FBS+1%P/S

倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr- IMDM+10%FBS+P/S1%+0.05mM次+0.016mM胸腺嘧啶+100nM氨甲喋呤。

中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1 F12K+10%FBS+1%P/S

中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1（懸浮） CHO GROW CD2培養(yǎng)基+1%L-谷氨酰胺+1%P/S

中國倉鼠卵巢細胞 CTLA4 IG-24 DMEM+10%FBS+0.2mM脯氨酸+0.001mM氨甲蝶呤+1%P/S

倉鼠卵巢細胞 LEC-1 MEMα+10%FBS+1%P/S

人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞 95-D  1640+10%FBS+1%P/S

 人肺癌細胞 A549  F12K+10%FBS+1%P/S   

 人肺癌細胞+RFP A549+RFP F12K+10%FBS+1%P/S

 人肺癌細胞熒光素酶標記 A549+luc F12K+10%FBS+1%P/S

人肺癌細胞 Calu-1 MCCOY'S 5A+10%FBS+1%P/S  

人肺癌細胞 DMS 53 Waymouth's MB 752/1 medium (Invitrogen, 11220-035)+10%FBS+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞 HCC827 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞熒光素酶標記 HCC827+LUC 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H1299 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%（10mM）HEPES +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人肺癌細胞 NCI-H1437 1640+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%hepes+1%PS

人經(jīng)典小細胞肺癌細胞 NCI-h1688 1640+20% FBS+1%P/S 細胞漲的慢2-3周發(fā)貨

人肺癌細胞 NCI-H1703 1640+10% FBS+1%P/S

人肺癌細胞 NCI-H1944 1640+10%FBS++1%PS

人肺癌細胞 NCI-H2126 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸鈉+1%P/S

人肺癌細胞 NCI-H2228 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉

人肺癌細胞 NCI-H23 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉

人肺癌細胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移) NCI-H292 1640+10%FBS+1%P/S

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H358 1640+10%FBS+1%P/S

人小細胞肺癌細胞 NCI-H446 1640+10%FBS+1%PS

人大細胞肺癌細胞 NCI-H460 [H460]  1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉

人非小細胞肺癌細胞 NCI-H524  1640+10%FBS+1%P/S

人大細胞肺癌細胞 NCI-H661[h661]  1640+10%FBS+1%P/S

人小細胞肺癌細胞 NCI-H82 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S

人肺癌細胞 pc-9 1640+10%FBS+1%P/S

人小細胞肺癌 SBC-2  1640+10%FBS+1%P/S   

人小細胞肺癌細胞 SHP-77 1640+10FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1% PS

小鼠肺癌細胞 LLC DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠肺癌細胞熒光素酶標記 LLC+LUC DMEM+10%FBS+1%P/S